High Performance Liquid Chromatography – HPLC
Agilent 1200 Series Agilent 1100 Series
كروماتوگرافي مايع
كروماتوگرافي مايع (LC) يك تكنيك جداسازي است كه در آن فاز متحرك، مايع است. كروماتوگرافي مايع را ميتوان در يك ستون يا يك صفحه انجام داد. كروماتوگرافي مايعي كه امروزه انجام ميشود، معمولا از ذرات packing بسيار كوچك و يك فشار نسبتا بالا استفاده ميكند و كروماتوگرافي مايع با كارائي بالا (HPLC) ناميده ميشود.
همان طور كه ذكر شد كروماتوگرافي، فرايندي براي جداسازي اجزاي نمونه بر اساس تفاوت در ميل تركيبي آنها با دو محيط مختلف به نام فاز متحرك و فاز ايستا است. فاز متحرك (حلال شستشو) گاز يا مايعي است كه از داخل فاز ايستا (جاذب) ميگذرد. فاز ايستا به نحوي پيكربندي ميشود كه اجزاي نمونه به سطح آن بچسبند؛ در HPLC اين فاز يا مايع تركيب شده با جامد (معمولا سيليس و/يا پليمرهاي آلي) است يا مايعي است كه فاز متحرك با يك پمپ در فشار بالا (به عنوان مثال 5000 پوند بر اينچ مربع psi)، از درون آن عبور ميكند. اجزاي نمونه كه حل پذيري بيشتري در حلال يا ميل تركيبي كمتري به جاذب (sorbent) دارند، سريعتر حركت كرده و مسافت بيشتري جلو ميروند.
تــكــنــيـــكهـــاي HPLC بـــراي مـــانــيــتـــوركــردن داروهــائــي مــانـنــد عــوامــل ضــدآريـتـمــي، آنـتــيبـيــوتـيــكهـا، داروهـاي ضـدصـرع، مـسـكـنهـا، شـل كـنـنـدههـاي عـضـلات بـرونـش (bronchial) و داروهاي ضدافسردگي tricyclic استفاده ميشوند. يك اجراي كروماتوگرافي مـــيتـــوانـــد هـمـــزمـــان چـنــديــن دارو و بــرخــي از مــتـــــابـــــولــيــــتهــــاي آنهــــا را تــجــــزيــــه كــنــــد. در كـرومـاتـوگـرافـي مـايـع از حلالهاي فاز متحرك استفاده ميشود كه ميتواند به راحتي تركيبات قطبي مانند آنهائي كه در مايعات بدن وجود دارند را حل كند و لذا ميتواند به آساني پروتئينها و پپتيدها را تفكيك كند.